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血清脂蛋白的離心分離方法

時(shí)間:2015年12月22日 信息來源:湘智離心機(jī) 字體: 打印此頁

血清脂蛋白的快速離心分離法

利用不同容量的角式轉(zhuǎn)頭及很容易配制的梯度液,在各種型號的超速離心機(jī)上都能得到滿意的分離結(jié)果。下面舉了幾個(gè)分離實(shí)例,實(shí)際上還可以應(yīng)用于各種型號各種容量的固定角式轉(zhuǎn)頭。

(一)梯度液 A液:11.40gNacl,0.1g EDTA-Na2,置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1 ml 1N NaOH,混勻至全部溶解。加重蒸水至1000ml最后再加3ml重蒸水(Nacl:0.195mol)。終密度1.006g/cm3,PH10.37。 B液:加24.98g NaBr 到100ml A液中。終密度1.182g/cm3。(Nacl:0.195mol, NaBr:7.65mol),PH9.72。 C液:加78.32g NaBr 到100ml A液中。終密度1.478g/cm3。(Nacl:0.195mol, NaBr:7.65mol),PH8.86。 (二)離心機(jī)及轉(zhuǎn)頭 • 離心機(jī):Hitachi CP-MX系列超速離心機(jī)或其他類似機(jī)組。 Hitachi CS-150GXL微量超速離心機(jī)。 • 轉(zhuǎn)頭,離心管;S 140 AT:140,000rpm,1,050,000×g,10×2ml,K=5,1PC厚壁管。 S 80 AT3:80,000rpm,415,000×g,8×8ml,K=23,6PC厚壁管。 S 70 AT:70,000rpm,505,000×g,8×40ml,K=44,40PA管。 (三)血漿-血球分離: 全血,角轉(zhuǎn)頭或甩平轉(zhuǎn)頭3000rpm×20min,沉淀為血細(xì)胞,上清血漿待用。 (四)乳糜粒分離 離心參數(shù):各種轉(zhuǎn)頭均可用,4×106(g×min),10℃ 梯度液:離心管下部3/4容積為血漿,上部1/4容積為0.15MNacl+0.3MEDTA。PH7.4。 離心結(jié)果:乳糜粒上浮,離心管傾斜,吸管貼管壁慢吸出(約占血漿容積的2~6%。禁令12小時(shí)以上供血者血漿中乳糜含量很低,食后供血者含量較高。 (五)血清脂蛋白分離 VLDL分離(ρ<1.006g/cm3

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      轉(zhuǎn)頭 離心管內(nèi)液體分布 離心參數(shù) 結(jié)果

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