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同樣為動(dòng)態(tài)上樣,但出樣不一樣。為提高出樣區(qū)帶的分辨率,采用轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速降為零的靜態(tài)出樣,區(qū)帶在轉(zhuǎn)子降速過(guò)程中,由垂直區(qū)帶變?yōu)樗絽^(qū)帶,該轉(zhuǎn)子的進(jìn)、出樣孔分布在上、下。做上述同樣的第一組KBr區(qū)帶離心步驟如下:
1.把清洗干凈的轉(zhuǎn)子按操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行組裝并加入離心腔;
2.連接下、上的進(jìn)、出樣管道;
3.設(shè)置離心機(jī)并啟動(dòng)使轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速到4000r/min的區(qū)帶轉(zhuǎn)速;
4.加入密度為1.04克每立方厘米的KBr梯度液充滿整個(gè)轉(zhuǎn)子腔;
5.加入密度為1208克每立方厘米的KBr梯度液2000mL;
6.加入密度為1.32克每立方厘米的樣品4000mL;
7.加密度為1.33克每立方厘米的KBr墊液100mL;
8.設(shè)定離心機(jī)轉(zhuǎn)速為25000r/min運(yùn)行22h;
9.離心機(jī)運(yùn)行22h后自動(dòng)降速為4000r/min,用密度為1.33克每立方厘米的KBr溶液來(lái)置換需要的樣品,這時(shí)同樣要把出樣管連接至紫外監(jiān)測(cè)儀,根據(jù)紫外監(jiān)測(cè)儀對(duì)蛋白吸收的峰值來(lái)判斷需要收集的有效區(qū)帶樣品。
從轉(zhuǎn)子容量可以看出,超速離心機(jī)所配的轉(zhuǎn)子容量是P35ZT轉(zhuǎn)子容量的4倍多,更適合種類疫苗大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。
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